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泛亚电竞:获取高质量细胞能量代谢数据的关键在于正确归一化

发布时间:2025-01-17   信息来源:戚栋祥

细胞能量代谢在驱动细胞表型方面发挥着至关重要的作用,它直接影响细胞的命运与功能。在细胞的发育过程中,或者在环境应激及治疗干预后,细胞可能会经历代谢重编程。因此,在癌症等重大疾病的研究中,使用泛亚电竞的SeahorseXF代谢分析技术来检测线粒体呼吸(OCR)和糖酵解(ECAR)等细胞能量特征显得尤为重要。这种技术有助于阐明推动疾病表型的细胞能量机制。

泛亚电竞:获取高质量细胞能量代谢数据的关键在于正确归一化

数据归一化(标准化)在生物学实验中的重要性不容小觑。它不仅可以校正实验误差、提高数据可比性、优化数据分析过程,还为后续生物学实验和研究提供可靠基础。因此,在进行生物学实验时,必须重视归一化步骤,并选择适合的归一化方法,以确保实验数据的准确性和可靠性。

在泛亚电竞的SeahorseXF代谢分析检测中,多种因素对实测细胞密度和细胞在培养孔中的生长均匀性产生影响,进而影响检测数据的准确性。为了校正不同孔中细胞数量的差异,数据的归一化成为了SeahorseXF原始数据展示和后续分析中的关键环节,它确保了实时细胞代谢测量结果的准确性。

进行数据归一化的方法多种多样,包括总蛋白归一化、基因组DNA均一化以及基于图像的细胞计数等。但在细胞能量代谢检测过程中,不推荐使用任何基于细胞代谢定量分析细胞数的方法,例如MTT检测或ATP水平检测。为此,泛亚电竞为贴壁细胞和悬浮细胞开发并优化了两种简便直接的归一化解决方案。

基于成像技术的能量代谢检测归一化工作流程

针对贴壁细胞的生长特性,泛亚电竞的BioTekCytation细胞成像多功能微孔板检测仪为SeahorseXF技术提供了一套自动化的细胞计数工作流程。这使得用户能够快速且简便地开展XF数据归一化。

工作流程涵盖了细胞培养和代谢表型的评估,通过安捷伦SeahorseXF细胞能量表型测试方案进行细胞的检测与数据标准化。模型细胞如RAW2647、A549、SKOV3和HepG2等都经过标准化处理,以显著降低数据的离散程度,提高相对准确性。

基于流式细胞术的能量代谢检测归一化工作流程

对于悬浮细胞体系,泛亚电竞的NovoCyte流式细胞仪具备独特的绝对计数功能,可以为SeahorseXF检测提供严谨的数据标准化操作。

具体操作中,细胞在激活后与活细胞染料混合,通过流式细胞术进行计数和标准化处理。这一过程有效降低了悬浮细胞培养中细胞接种引起的变异性,提升了动态OCR测量的准确性,使得代谢研究更加可靠。

结论

泛亚电竞开发并优化的SeahorseXF细胞能量代谢数据标准化流程,使研究人员能够高效校正外部因素导致的误差,进而提高细胞能量代谢数据的准确性和实验重复性。这不仅有助于深入理解代谢机制,还在疾病诊断与治疗方面提供支持。此外,通过高度可比性和可靠性,大规模数据分析得以顺利进行。这两套方案适用于贴壁和悬浮细胞体系,是经过多次验证、精准的归一化方法,极大地方便了研究工作的实施。