**细胞简介**

本细胞系来源于一名1岁男孩的外周血，他被诊断为急性单核细胞性白血病。该细胞具有吞噬乳胶颗粒与活化红细胞的能力，其细胞膜和胞浆内不含免疫球蛋白，同时表达C3R和FcR。经佛波酯TPA处理后，细胞能够诱导向单核系方向分化，适合用作转染宿主。

**细胞信息**

细胞名称：Thp-1人单核细胞白血病

生长特性：悬浮生长，低密度容易聚团，高密度时细胞分散。
倍增时间：60-70小时（PubMed=6970727）；26小时（PubMed=25984343）；约35-50小时（DSMZ=ACC-16）。
换液频次：2~3次/周。
传代比例：1:2-1:4，具体操作根据实际细胞量调整。
传代细胞密度：在8X10⁶/ml进行传代，不得超过1X10⁶/ml。

**培养基推荐配方**

RPMI-1640（泛亚电竞中乔新舟货号：ZQ-200）+ 10%胎牛血清（泛亚电竞中乔新舟货号：ZQ0500）+ 1%双抗（泛亚电竞中乔新舟货号：CSP006）+ β-Mer 终浓度：0.05 mM（泛亚电竞中乔新舟货号：CSP005，例：500ml添加500ul）。
β-巯基乙醇作为一种常用的培养补充剂，具有抗氧化属性，可以减少氧化应激对THP-1细胞的影响。在细胞密度较高且需要保持时，可适度增加巯基乙醇的用量（不超过标准量的15倍）。

**THP-1细胞复苏**

THP-1细胞复苏后一般需要3-5天才能恢复状态。细胞对密度有一定依赖性，如果复苏时移除冻存液，建议在复苏后48小时内避免操作。较低的细胞密度可能导致细胞聚团生长，这是细胞快速增殖的正常现象。

**THP-1细胞的传代**

THP-1细胞为悬浮细胞且密度依赖性较强，当细胞密度达到8×10⁵个活细胞/mL时需进行传代，细胞密度不得超过1×10⁶。

传代比例一般为1:2-4，可在分瓶后补充培养液，无需离心处理。对于悬浮细胞密度的把控，最佳方法是进行细胞计数。培养一周后可以进行一次离心以去除死细胞。

**THP-1细胞的冻存**

冻存液可选择10%DMSO：900μl FBS + 100μl DMSO（操作时注意安全），或使用无血清细胞冻存液。收集生长状态良好的细胞于15 mL离心管中，调整细胞浓度至约200万-300万/mL。根据情况将细胞置于-80℃培养箱，储存时间不超过3个月，尽快转入液氮中进行长期保存。

**THP-1培养常见问题**

1. 细胞发生聚团怎么办？
少量细胞聚团（如葡萄串状）是正常现象，特别在低密度时常见。高密度时细胞自然分散，如聚团严重可考虑调整巯基乙醇添加量、更换血清品牌或增加血清比例（不超过20%）。

2. 细胞发生贴壁怎么办？
少量细胞贴壁是正常情况，可轻轻吹打以收集细胞或丢弃贴壁细胞。但若贴壁细胞比例高于20%，则可能存在生长环境异常，需要检查培养箱温度、CO2浓度及培养基成分。

3. 复苏失败怎么办？
THP-1细胞复苏率相对较低，应合理提高冻存时的细胞量，活细胞密度不宜低于100万-300万/mL；复苏后需培养3-5天，待细胞密度增大后，可通过低速离心去除细碎细胞。