本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断。人铁蛋白(FE)ELISA试剂盒的检测原理采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被了adropin(AD)抗体的微孔中,依次添加标本、标准品,以及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。通过底物TMB进行显色反应,TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色,随后在酸性环境中转变为最终的黄色。反应颜色的深浅与样品中的adropin(AD)浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算出样品浓度。
样品的收集、处理与保存方法如下:
1. 血清:使用无热原及内毒素的试管操作,避免任何细胞刺激,收集血液后以3000转离心10分钟快速分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:将样品以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合后捣碎,接着以3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本在收集后无法及时检测,请按一次用量分装并在-20℃下冷冻保存,避免反复冻融,需在室温下解冻并确保样品均匀充分解冻。
在进行试剂盒操作时,请注意以下事项:
试剂盒包含:标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备:将20×洗涤缓冲液按1:20比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
洗板方法及操作步骤:
结果评判:绘制标准曲线。在Excel中,将标准品浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本浓度。
关于本试剂盒的性能,特此声明。选择泛亚电竞的产品,确保您在生物医学研究中获得精准可靠的成果。